Вирус гепатита с пцр рнк качественное определение

Содержание

Расшифровка анализа РНК вируса гепатита С

Вирус гепатита с пцр рнк качественное определение

09.04.2018

Когда необходимо определить наличие вируса гепатита С в организме, следует провести анализ РНК, расшифровка которого и даст нужную информацию.

С помощью этого анализа можно выяснить, есть ли у пациента следы заболевания, а также определить, как далеко оно зашло, о каком именно типе патологии идет речь.

После выяснения этой информации можно назначать терапию наиболее подходящего вида.

Когда необходимо определить наличие вируса гепатита С в организме, следует провести анализ РНК, расшифровка которого и даст нужную информацию

Что такое РНК вируса

РНК вируса гепатита С представляет собой генетическую структуру заболевания, которое поражает, в первую очередь, печень. Процесс заражения происходит, как правило, через кровь, поэтому наиболее часто заражение этим заболеванием происходит во время операций, проведенных плохо стерилизованными инструментами, или при переливаниях, если не были проведены все необходимые анализы.

Выясняя, что такое РНК гепатита и как можно заразиться этим заболеванием, нужно также отметить, что опасны все биологические жидкости. Поэтому при плотном контакте с больным нужно соблюдать большую осторожность.

Случаются и ситуации, когда анализ выявляет следы такой патологии у новорождённых детей, если их матери страдали этим заболеванием.

Для печени опасность вируса зависит от того, какой формой патологии страдает пациент.

  1. Острая форма. Характеризуется болями в печени, резкими изменениями цвета кожи на желтоватый, рвотой, повышением температуры, часто приступ начинается после употребления алкогольных напитков или вредной пищи, особенно жирной и острой.
  2. Хроническая форма. На начальном этапе эта форма заболевания никак не проявляется и потому считается гораздо более опасной, чем острая. Именно пациенты, страдающие от хронического гепатита С, чаще всего сталкиваются с раком или циррозом печени.

При этом около 70% людей, столкнувшихся с острой формой болезни, рано или поздно приобретают и хроническую. Это зачастую характеризуется злокачественными изменениями структуры печени.

Виды анализов и их отличия

Основным анализом, определяющим содержание в крови РНК гепатита С, является HCV. Для него берётся кровь из вены, и такой метод называется также ПЦР. Определение методом ПЦР обнаруживает нуклеиновые элементы в крови, принадлежащие С-вирусу.

Существует два вида исследований РНК заболевания:

Определение методом ПЦР обнаруживает нуклеиновые элементы в крови, принадлежащие С-вирусу

  1. Качественное исследование. Позволяет определить, заражен ли пациент вообще инфекцией. Определение РНК этого заболевания почти всегда возможно, если болезнь зашла достаточно далеко.

    Ошибки могут возникнуть только на самом начальном этапе развития патологии, когда содержание её частиц в крови ещё слишком мало, чтобы быть обнаруженным и определенным.

  2. Количественное HCV-исследование.

    Это второй этап анализа, когда качественное исследование уже показало, что у пациента возникли проблемы. Количественный анализ позволяет определить, как сильно развилась болезнь.

Кроме того, после количественного проводится генотипическое исследование, с помощью которого можно также выяснить, каким именно видом болезни страдает пациент. В России активно распространены всего три, и схемы лечения различаются.

Расшифровка анализа на определение РНК гепатита С

Когда анализируется РНК, результаты HCV, необходимые для правильного лечения, включают в себя три основных пункта:

  1. Положительный или отрицательный результат дал качественный анализ на гепатит РНК. В этом случае, что значит получение положительного результата: в первую очередь, вероятность заражения для окружающих. При этом положительный HCV может указывать также на недавно перенесённый острый приступ заболевания, при котором в организме ещё остались следы. Однако, если результаты показывают, что не обнаружено следов этой патологии, это почти всегда значит, что пациент здоров. Иногда на начальном этапе болезнь может быть не выявлена. Это происходит из-за того, что тест может демонстрировать результат «РНК гепатита не обнаружено», если его содержание в крови крайне мало.
  2. Количество рибонуклеиновых кислот, когда тест все же дал положительный результат. Он позволяет определить то, насколько сильно успело развиться заболевание.
  3. Конкретный вид заболевания. Если расшифровываются тесты на гепатит, определение его вида — одно из важнейших условий для правильного лечения. Даже существующие в России типы этой болезни требуют разницы в подходе, и терапия в каждом отдельном случае будет выглядеть по-разному. Особенно сложной ситуация станет, если пациент болен каким-либо экзотическим видом. В результатах это часто отмечается прочерком в графе определения типа и требует дополнительного осмотра.

Для получения точных результатов, соответствующих ситуации, необходимо перед началом осмотра и передачи материалов на исследование соблюдать некоторые правила:

  • за трое суток до сдачи отказаться от вредной пищи, алкоголя, приёма лекарств;
  • отказаться от ультразвука, рентгена и прохождения других видов осмотра за две недели до сдачи;
  • сдавать кровь натощак, желательно утром.

Только в этом случае полученные результаты будут достаточно точными для того, чтобы поставить по ним правильный диагноз.

Показатели качественного теста

Определение РНК гепатита С с помощью качественного теста требуется в каждом случае, когда в организме пациента есть антитела к этому заболеванию.

Результат может быть представлен только в крайне простой форме: «вирус гепатита С обнаружен» или «не обнаружен»

При этом результат может быть представлен только в крайне простой форме: «вирус гепатита С обнаружен» или «не обнаружен». Если результат положителен, то это означает, что болезнь активно развивается или, как минимум, находится в хронической стадии.

Выявление вируса происходит при помощи теста, который настроен на определённый уровень восприятия частиц. Он способен уловить только РНК болезни в диапазоне от 10 МЕ/мл до 500.

Если его содержание в крови ниже этого уровня, то тест покажет отрицательный результат.

Кроме того, вероятность искажения результатов как в случае качественного, так и в случае количественного тестов увеличивают следующие факторы:

  • плохо взятая для теста кровь (например, в недостаточно очищенной пробирке или с неправильной техникой забора крови);
  • использование средств, содержащих гепарин и другие вещества, способствующих свертываемости крови (они уменьшают эффективность теста);
  • неправильная перевозка материалов до лаборатории.

Важно соблюдать и обычные правила сдачи крови для анализа, перечисленные выше.

Показатели количественного теста

Когда анализируется гепатит С и его РНК, и получен положительный ответ на результаты качественного теста, следующим будет проведен количественный ВГС. Его расшифровка указывает на то, какова концентрация заболевания в организме.

Норма при количественном исследовании выглядит следующим образом:

Количество вируса в организме пациента, МЕ/мл Расшифровка результата Вирус не обнаружен Обычное состояние человека, не больного гепатитом, или того, у которого содержание вируса в крови минимально и не может быть определено качественным тестом
Уровень не превышает 1.8*102Низкий уровень заражения (количество содержания гепатита проходит по минимальной границе)Уровень не превышает 8*105Уровень заражения все ещё достаточно низок, и допустимо быстрое и эффективное излечение пациента
Уровень превышает 8*105Уровень заражения высокУровень превышает 2,4*107Уровень заражения существенно превышает норму, допускающую лёгкое излечение

Резкие изменения уровня вируса в крови могут указывать на обострение и стремительное развитие заболевания.

После количественного теста проводится генотипический, определяющий, каким именно вирусом болен пациент.

Чувствительность тестов и частота их проведения

Тест обладает высокой чувствительностью к РНК вируса гепатита С. Он может выявить даже самый минимальный уровень содержания болезни в крови. При этом количественный анализ способен точно описать, сколько генетической информации об этой проблеме содержится в организме.

Тест проводится несколько раз в течение болезни:

  1. Перед началом терапии для правильного определения состояния организма в целом и молекулярной структуры отдельного вида заболевания. Это позволяет назначить правильное лечение.
  2. В ходе терапии, на 4 неделе, а потом и на 24. Изменение уровня болезни в нужном участке молекулы ДНК является сигналом того, насколько правильно построено лечение.
  3. После терапии, когда подводится итог, и лечащему специалисту необходимо убедиться, что все гены пациента больше не содержат следов патологии.

Иногда приходится также повторять тест через три месяца, полгода и год. Избегать этих проверок не следует — это значит подвергать опасности окружающих.

Репликация вируса гепатита C.

Расшифровка анализа РНК вируса гепатита С Ссылка на основную публикацию

Источник: https://pechen.org/gepatit/analiz-rnk-rasshifrovka.html

Диагностика гепатита С с помощью ПЦР РНК — количественный и качественный анализ, расшифровка

Вирус гепатита с пцр рнк качественное определение

Это средство с натуральным составом поможет печени даже в самых тяжелых случаях…

Своевременный и качественно проведенный анализ ПЦР на гепатит С позволяет подтвердить или исключить присутствие вируса в организме. Одно из главных достоинств методики — вирус можно обнаружить сразу после заражения, не дожидаясь явных проявлений симптомов заболевания.

Гепатит С вызывается вирусом HCV (hepatitis C virus), содержащим рибонуклеиновую кислоту. Основная опасность HCV — это длительный промежуток времени, который разделяет моменты заражения и появления реакций со стороны иммунитета (от полутора до шести месяцев). ПЦР дает возможность намного раньше определить наличие РНК вируса в крови, поставить точный диагноз, начать лечение.

Варианты анализа

Впервые методика была использована в начале 70-х годов прошлого столетия норвежскими учеными. В ее основе — многократное копирование определенного, относительно короткого участка ДНК вируса при помощи молекул РНК. И сравнивание полученных фрагментов с сывороткой крови человека.

Что такое ПЦР при гепатите? Проводимая полимеразная цепная реакция (ПЦР) показывает:

  • Присутствие или отсутствие вируса;
  • Количественный анализ поражения;
  • Генотип обнаруженного вируса гепатита.

На основе полученных данных определяется степень эпидемиологической опасности (степень инфицирования и риск передачи другим людям), а также прорабатывается последовательность терапевтических мероприятий.

Исследования ПЦР назначаются:

  • При выявлении симптомов воспаления печени;
  • Для профилактических скрининговых исследований;
  • Для обследования в случае доказанного контакта с больным человеком;
  • При диагностировании гепатитов разных классов;
  • Чтобы узнать степень активности вируса при хроническом гепатите;
  • Для оценки адекватности лечения.

Кандидат медицинских наук, врач В. М. Савкин:Очистка печени поможет омолодить организм за несколько дней и подарит дополнительных 15 лет жизни…

Качественный анализ

Качественный ПЦР-анализ позволяет доказать или исключить присутствие ВГС (вируса гепатита С) в биологических жидкостях. Несмотря на то, что качественное исследование может дать только два результата — положительный либо отрицательный, правильно расшифровать данные очень важно.

  1. Положительный. Указывает на присутствие вируса гепатита С в крови. Это значит — пациент инфицирован. Определенный процент оставляют на возможность получения ложного результата. Но постановка диагноза при наличии других симптомов уже возможна.
  2. Отрицательный. Указывает на то, что РНК-вируса в исследуемом биоматериале не обнаружено. Или говорит о маленькой концентрации вируса, невысокой чувствительности теста. Отрицательный анализ тоже бывает ложным.

Пример качественного анализа ПЦР РНК

Если гепатит развивается в острой форме, то качественный вариант исследования указывает на присутствие вируса в организме уже через 3 недели после заражения.

Количественный анализ

Количественный ПЦР указывает на степень вирусной нагрузки, отображает концентрацию вируса в организме. Исследование дает представление, какое количество фрагментов РНК-вируса содержится в 1 см3 крови.

Результат обозначается по общепринятой системе МЕ/мл — международных единицах на миллилитр. При показателях до 600000 МЕ/мл концентрация вируса считается низкой,среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл, выше 800000 МЕ/мл — высокой.

Пример количественного анализа

Количественная диагностика назначается перед началом терапевтического курса и на 12 неделе для определения эффективности выбранного курса терапии.

Метод помогает оценить следующие факторы:

  • Степень инфицирования пациента. При высокой концентрации вируса повышается риск заразить окружение;
  • Правильность выбранной терапии;
  • Длительность лечения и возможный прогноз (при большой вирусной нагрузке терапия длится довольно долго).

Гепатологи отмечают, что уровень концентрации вируса не имеет прямого влияния на тяжесть заболевания. Даже при очень высокой вирусной нагрузке печень может оставаться без серьезных повреждений.

Для профилактики, а также лечения заболеваний печени наши читатели успешно используют эффективное средство…

Определение генотипа

Способность к мутации вируса гепатита С очень высока. Поэтому важно определить его генотип перед началом долгого, дорогостоящего лечения. Всего существует 11 генотипов ВГС с большим числом подвидов.

Тест на генотип позволяет специалистам определить степень устойчивости вируса, подобрать адекватное лечение. Так, 1 генотип требует до 48 недель противовирусной терапии, а 2 и 3 лечатся быстрее и эффективнее (до 24 недель).

Генотипы вируса гепатита С

При генотипировании косвенно определяется состояние печени. Например, третьему генотипу свойственно развитие стеатоза — заболевания, при котором наблюдается накопление жира в тканях печени.

Тестовые системы при ПЦР не всегда выявляют тип вируса. Тогда пациент получает результат: «Не типируется». Это означает низкую чувствительность теста или нехарактерный подвид генотипа для географической зоны. Повторное диагностирование с более чувствительной системой позволят определить тип правильно.

Ультрачувствительный анализ

Метод ПЦР с применением гибридизационно-флуоресцентного исследования называется ультрачувствительным анализом (или ультра ПЦР).

Когда используется метод:

  • Если специалист, ведущий заболевание, обнаружил скрытые его формы;
  • При наличии антител к ВГС, не подтвержденных другим методиками;
  • Для подтверждения полного выздоровления после проведенной терапии;
  • Для выявления заболевания на ранней стадии при помощи скрининга.

Чтобы провести исследование, у пациента забирается венозная кровь. Этот способ дает чувствительность менее 10 МЕ/мл, а это в разы выше, чем при проведении типовых качественных и количественных анализов. Ультра ПЦР назначает гепатолог или инфекционист.

При обычных вариантах исследования возможно получение ложного результата. Это случается, если образцы крови или оборудование загрязнено. Ультрачувствительный анализ позволяет избежать таких ситуаций и облегчить диагностику.

Найдено натуральное средство, вызывающее отвращение к алкоголю! Елена Малышева: “Наверняка вам известно, что до недавнего времени единственным действенным средством для борьбы с алкогольной зависимостью было…”

Расшифровка анализов

Для получения адекватных результатов требуется строго соблюдать стерильность образцов биоматериала и условий проведения исследований. Любое отклонение дает неверные данные для аналитики, искажает картину заболевания, затрудняет постановку анализа и выбора правильного курса лечения.

Неточности при проведении анализа ПЦР случаются, поэтому рекомендуется пользоваться комплексным методом исследований.

По окончании лабораторных анализов доступны следующие данные:

  • Положительный/отрицательный (качественный анализ);
  • Вирусная нагрузка (количество фракций РНК, например, 630.920 МЕ/мл);
  • Номер генотипа HVC, например, 1;
  • Наименование используемого теста, например, Real-time.

Второй пункт традиционно считается наиболее важным. Он показывает степень вирусной нагрузки и является определяющим для выбора лечения.

Особенности

Не пытайтесь самостоятельно расшифровать анализ ПЦР. Его данные могут ввести неспециалиста в заблуждение. Например, качественный тест может быть отрицательным, а иммуноферментный анализ (ИФА), проведенный параллельно — положительным.

Это лишь значит, что вируса гепатита С на данное время в крови человека не обнаружено, но в прошлом у него была острая форма заболевания.

ИФА указывает на антитела, выработанные организмом после заражения. ИФА используется для первичных исследований, но достаточно надежным его специалисты не считают. Для конечной диагностики обычно выбирают данные ПЦР тестов.

Правила сдачи анализа

Кровь на ПЦР сдают непосредственно в лаборатории. Часто совмещают забор для 2 видов анализов — ПЦР и ИФА.

Чтобы результаты были корректными, требуется выполнение следующих правил:

  • Не принимать никакой пищи и напитков перед анализом;
  • Последний прием пищи должен состояться за 8 часов или более до забора биологического материала;
  • В предыдущий день перед сдачей анализа отказаться от жареной и жирной пищи;
  • Не менее суток перед сдачей не подвергаться физическим нагрузкам.

Метод ПЦР-диагностики считается быстрым и достоверным. Данные результатов можно получить на руки уже через сутки.

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки – победа в борьбе с заболеваниями печени пока не на вашей стороне…

И вы уже думали о хирургическом вмешательстве? Оно и понятно, ведь печень – очень важный орган, а его правильное функционирование- залог здоровья и хорошего самочувствия. Тошнота и рвота, желтоватый оттенок кожи, горечь во рту и неприятный запах, потемнение мочи и диарея… Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке.

Но возможно правильнее лечить не следствие, а причину?  Рекомендуем прочитать историю Ольги Кричевской, как она вылечила печень… Читать статью >>

Источник: http://NashaPechen.com/diagnostika/pcr-na-gepatit-c

Пцр на гепатит с: качественный и количественный анализ рнк вируса

Вирус гепатита с пцр рнк качественное определение

Полимеразная цепная реакция, а попросту ПЦР на гепатит С — современная методика диагностики вирусного воспаления печени. У болезни есть разновидности. Известны, к примеру, инфекции А и В типов.

Их симптоматика явная. Гепатит С, напротив, протекает скрытно, даже на острой стадии развития. ПЦР — надёжный способ ранней диагностики. Анализ позволяет подтвердить присутствие вируса в организме.

История применения полимеразной цепной реакции

Анализ ПЦР на гепатит стал общепринятым, стандартизированным в конце прошлого века.

До этого пройдены следующие этапы развития полимеразной диагностики:

  1. В 1970-х годах Хьелль Клеппе из Норвегии стал проводить эксперименты по увеличению фрагментов ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты). Её учёный удлинял при помощи праймеров. Так называют искусственные короткие нуклеиновые кислоты. Ввиду недостаточной изученности и неполной расшифровки строения ДНК, опыты Клеппе «не вышли» из стен лаборатории.
  2. В 1985 году в американском научном журнале появилась статья Кэри Мулисса. Он описал принципы проведения анализа с помощью многократного удвоения фрагментов исходного ДНК. В итоге Кэри Мулисса удостоили Нобелевской премии. Учёный получил её в 1993 году.
  3. Первоначально исследование проводилось при постоянном добавлении ДНК-полимеразы. Требовался нагрев. Высокие температуры распрямлялицепь ДНК. При этом полимераза инактивировалась, то есть становилась неактивной в реакции. Поэтому первая версия ПЦР была малоэффективной, требовала много времени и материалов.
  4. В 1986 году процедуру проведения анализа изменили. Стали использовать ДНК-полимеразу, полученную из термофильных бактерий. Такой материал устойчив к высоким температурам. Уменьшилось время проведения анализа, повысилась его точность и появилась возможность автоматизировать процесс.

Первоначально метод был запатентован. Права принадлежали компании «Хофман-Ла Рош». С 90-х годов прошлого века проведено несколько судов. К 2005 году истцамудалось заставить «Хофман-Ла Рош» отказаться от патента. Так ПЦР стала доступна для всех.



Суть анализа и механизм его проведения

В общих словах ПЦР — многократное копирование участков ДНК или РНК (рибонуклеиновой кислоты). «Размножают» заранее определённый фрагмент.

Для проведения исследования требуются:

  • предназначенный для репликации характерный участок РНК гепатита С;
  • два типа синтетического праймера;
  • катализатор реакции, коим служит ДНК-полимераза;
  • буферный раствор;
  • ионы магния;
  • высококипящее масло.

Во время анализа на выявление возбудителя гепатитаили других инфекционных заболеваний проводят 20-35 циклов.

В каждом из них последовательно повторяется 3 операции:

  1. Вначале материал возбудителя нагревают минимум до 90 градусов. В это время цепочки ДНК начинают разворачиваться.
  2. Следующая операция — отжиг, проводится при температуре 60-72 градуса. В этих условиях начинают работать праймеры.
  3. На заключительном этапе добавляется ДНК-полимераза, которая реплицирует матричную цепь.

Каждая операция длится определённое время. Денатурация или нагрев проводится на протяжении минимум 2 минут. Самая короткая операция отжига выполняется за 30 секунд. Последняя стадия самая длительная, может занять 7—10 минут.

Виды ПЦР

С помощью ПЦР на гепатит выявляют возбудителя вирусного воспаления печени. Однако анализ востребован и при выявлении отцовства. Также исследование используется в криминалистике.

Если предстоит диагностика гепатита С, врачи используют несколько разновидностей анализа ПЦР:

  1. Качественный анализ на гепатит. Исследование показывает наличие или отсутствие вируса в крови. У качественного исследования есть настройки чувствительности. Если патогена в крови менее 10МЕ (международных единиц) на миллилитр, результат исследования отрицательный. Верхняя граница чувствительности равна 500 МЕ на миллилитр.
  2. Гепатит С количественный анализ. Его ещё называют исследованием на определение вирусной нагрузки. Определяют число РНК вируса гепатита C. Количественный анализ тоже проводится на 1 миллилитре крови пациента.

Качественный анализ проводится перед-, либо во время лечения. С помощью исследования врачи находят ответ на 3 вопроса. Во-первых, определяется степень риска передачи возбудителя от больного человека здоровому. Во-вторых, проверяется эффективность проводимого лечения. Третий ответ, «вытекающий» из результатов ПЦР — время, необходимое для терапии гепатита С.

Определяет ли ПЦР генотип и квазитип вируса

Вирусам свойственно быстро мутировать. Возбудитель гепатита С — рекордсмен среди них. Пытаясь остаться незамеченным иммунной системой человека, патоген меняет генетический набор. Его вариаций у гепатита С 11. Официально признаны 6. Прочие Всемирная Организация Здравоохранения не фиксирует, поскольку ещё не выявлены возбудители.

У каждой разновидности гепатита С имеются подвиды. Их именуют квазитипами. Первичные же вариации называются генотипами.

Для успешной борьбы с гепатитом С важно знать, какой именно генотип вируса попал в организм. В каждом конкретном случае применяются разные методики лечения.

Анализ ПЦР гепатита С даёт информацию о генотипе патогена, но не в 100% случаев. Если вирусная нагрузка низкая, определить разновидность возбудителя сложно.

Каждая разновидность вируса распространена в определённых географических зонах, а именно:

  • тип 1 в чаще встречается в государствах бывшего Советского Союза;
  • тип 2 чаще встречается в Европе и Северной Америке;
  • генотипы 5 и 6 редкие, характерны только для некоторых африканских и азиатских стран.

Исследование ПЦР в лабораториях направлено на выявление типов, распространённых в конкретном государстве. Поэтому порой выдаётся результат «не типируется». В этом случае, а также при низкой вирусной нагрузке, желательно пройти повторное исследование в лабораториях с более чувствительной аппаратурой.

Когда проводят ПЦР

К каждому медицинскому исследованию должны быть показания. По крайней мере, это касается обслуживания по полису обязательного медицинского страхования. Врач назначит цепную реакцию (или ПЦР) для диагностики гепатита, если имеются подозрения на воспаление печени.

К его симптомам относятся:

  1. Общая слабость. Пациент быстро утомляется. Слабость ощущается во всех органах и системах, постепенно нарастает.
  2. Чувство тяжести в животе. Наблюдаются болевые ощущения в области правого подреберья.
  3. Отсутствует аппетит. Пациент чувствует тошноту.
  4. Желтуха. Проявляется на острой стадии гепатита примерно у 70% больных.
  5. Сосудистые звёздочки на кожном покрове. Обычно появляются возле пупка.
  6. Боли в суставах. Напоминают ломоту при гриппе.

Качественный анализ проводят всем, при возникновении подозрений на гепатит при условии наличия должного оборудования. Количественную реакцию делают при подтверждённом диагнозе при начале лечения для определения метода терапии. Проводят анализ и во время лечения, дабы определить эффективность выбранного курса и сроки его окончания.

Подготовка к анализу

ПЦР-тест, как и любое медицинское исследование, проводится по правилам. Требования есть как к медицинским работникам, так и пациентам.

К сдаче проб нужно подготовиться:

  • перед сдачей анализа необходимо голодать 8—12 часов, поэтому исследование проводится утром;
  • неделю до посещения процедурного кабине нужно придерживать диеты, отказавшись от жирных, копчёных и солёных блюд, алкогольных напитков;
  • за неделю до ПЦР прекратить курить;
  • за сутки до сдачи проб нельзя проходить рентген, флюорографию, ультразвуковое исследование;
  • пациентки во время менструации не проходят анализ ПЦР на гепатит С,в связи активной гормональной перестройкой.

Приём некоторых медикаментов может повлиять на результаты анализа. Поэтому за неделю до ПЦР стоит отказаться от лекарств, а если это невозможно, сообщить о принимаемых средствах врачу.

Повлиять на результаты ПЦР могут также любые заболевания, в острой или хронической форме. Поэтому об известных диагнозах тоже сообщается доктору.

Расшифровка результатов анализа

Когда врачи расшифровывают результаты ПЦР, они определяют отклонения от нормы, получают данные о типе вируса.

Лаборатория выдаёт бланк, в котором указывается следующая информация:

  1. Обнаружен или нет вирус. Как правило, пишется «найдено» и «не найдено». Если речь идёт о качественном анализе ПЦР, это единственные данные на бланке.
  2. При количественном исследовании указывается уровень вирусной нагрузки. Прописывается число РНК-фракций на один миллилитр крови. Высокий уровень концентрации возбудителя гепатита — более 800 тысяч МЕ.
  3. В результатах анализа указывается генотип вируса гепатита С. Если определить подвид патогена не получилось, выдаётся результат «не типируется».
  4. Указывается в бланке и название проведённого теста.

В некоторых лабораториях расшифровку дополняют другой информацией. Это зависит от оснащённости учреждения, его специализации.

Стоимость ПЦР

На анализ крови ПЦР цена определяется множеством факторов:

  • престижностью лаборатории;
  • характером учреждения – в государственных клиниках за анализ берут меньше, нежели в частных;
  • сложностью исследования, так, количественный анализ дороже качественного.

Цена анализа ПЦР на вирус гепатита С варьируется в пределах от 400 до 11 тысяч рублей.

Исследование сложное, поэтому не стоит забывать о сроках. Обычно результаты анализа ждут от нескольких часов, до восьми дней. Скорость, как правило, зависит от объёма проделываемой лаборантами работы, типа аппаратуры. На изношенной и устаревшей технике в некоторых государственных клиниках анализ делают дольше.

Источник: https://gepatit.su/diagnostika/ptsr-analiz

Качественный и количественный анализ ПЦР на гепатит С: отрицательный, положительный, расшифровка

Вирус гепатита с пцр рнк качественное определение

Гепатит С — вирусное заболевание печени, вызываемое флавивирусом HCV (от англ. hepatitis C virus), в структуре которого содержится молекула рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК несет генетический код вируса. Ее наличие позволяет проводить анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность HCV для человека заключается и в том, что так называемое серологическое окно (промежуток времени между заражением и появлением реакции со стороны иммунной системы) может быть достаточно длительным — от нескольких недель до шести месяцев.

Это не дает обнаружить инфицирование и начать лечение вовремя.

В зависимости от индивидуальных особенностей организма носителя HCV может проявляться в острой форме, а также протекать как хроническое заболевание, которое потребует длительного и дорогостоящего лечения. При выявлении антител к HCV проводится ряд лабораторных анализов, в том числе ПЦР на гепатит С. Этот тест делается всем людям, в чьей крови были найдены антитела к HCV.

Что такое анализ ПЦР?

Лабораторный анализ ПЦР на гепатит С — исследование биологического материала с целью выявить наличие флававируса.

Полимеразная цепная реакция (так расшифровывается аббревиатура) показывает количественное значение вирусного поражения организма, его качественные характеристики, а также генотип вируса, содержащего РНК.

На их основе, а также на базе дополнительных анализов определяется способ и длительность терапии, а также эпидемиологический фактор (степень риска передачи другому носителю).

Что такое РНК-анализ на гепатит С?

ПЦР гепатита С еще называют РНК-анализом (HCV RNA), т.к. флававирус содержит в себе частицу РНК размером вириона 30-60 нм. Одной из особенностей этого микроорганизма является высокая склонность к мутациям.

Каждый из подвидов (генотипов) вируса имеет различную резистентность, что обуславливает разные методики лечения и характер дальнейшего прогноза для пациента.

Биологический материал (венозная кровь) сдается натощак и, как правило, тестируется методом Real-Time PCR (высокочувствительной диагностики в режиме реального времени с нижним лимитом определения 15 МЕ/мл с применением закрытых автоматизированных систем).

Существуют другие тесты, например COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл. Для любого лабораторного исследования важен порог чувствительности, т.е. способности реагента выявить минимальную концентрацию вируса в биологическом материале.

Референсное значение теста (нормальные показатели) — «не найдено».

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

ПЦР на гепатит С включает в себя три важных составляющих:

  • качественный анализ;
  • количественный анализ;
  • генотипирование.

Эти тесты позволяют определить характер виремии, а также генетические признаки возбудителя. В зависимости от чувствительности диагностической системы, исследование проводится один раз, и иногда для подтверждения или уточнения результатов делается повторный тест с более чувствительным реагентом.

Качественный ПЦР гепатита С

Анализ ПЦР на гепатит С качественный — это другое общее название анализа полимеразной цепной реакции. Стандартная чувствительность теста, позволяющего выявить наличие вирусного поражения, находится в пределах 10-500 МЕ/мл.

Негативный анализ ПЦР на гепатит С показывает, что концентрация вируса в крови пациента находится ниже порога восприимчивости диагностической системы.

Если качественный ПЦР дал ответ «не обнаружено», то для последующего лечения важно узнать порог чувствительности реагента.

Положительный ответ на ПЦР анализ на гепатит С может быть дан уже на 4-5 сутки после заражения HCV.

Белковые фракции к флававирусу появляются значительно позже.

Количественный ПЦР гепатита С

ПЦР гепатит С количественный — это показатель вирусной нагрузки, который отображает уровень концентрации РНК флававируса в организме.

Это показатель, отображающий, сколько фрагментов вирусной РНК содержится на один кубический сантиметр крови.

Результаты ПЦР РНК гепатита С количественного теста в общепринятой системе обозначаются в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) и могут записываться разными способами, например — 1,7 млн или 1.700.000 МЕ/мл.

Количественная ПЦР диагностика гепатита С назначается пациентам перед началом противовирусной терапии, и на 12 неделе лечения, чтобы оценить результаты выбранного метода борьбы с HCV. Вирусная нагрузка позволяет определить три важных показателя заболевания:

  • инфекционность, т.е. степень риска передачи вируса от одного носителя к другому (чем выше концентрация РНК флававируса, тем выше вероятность заразить другого человека, например, при половом контакте);
  • метод и эффективность лечения;
  • длительность и прогноз противовирусной терапии (чем выше вирусная нагрузка, тем дольше длится лечение).

Количественная ПЦР диагностика гепатита С зависит от типа лабораторного теста и порога его чувствительности. Нижней границей нормы принято считать показатель до 600.000 МЕ/мл, среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и выше считаются высоким уровнем концентрации РНК-содержащего вируса.

Важно: нет прямой связи между уровнем HCV RNA в крови и тяжестью заболевания. У больного может быть очень высокая вирусная нагрузка, но это еще не свидетельствует о том, что имеется серьезное поражение клеток печени.

Генотипирование

Ввиду высокой мутационной активности HCV в природе при тестировании важно выявить, какой именно генотип вируса находится в крови пациента. Всего на планете зафиксировано 11 генотипов вируса гепатита С, в которые входят множество подвидов (субтипов). На территории РФ распространены 1,2 и 3.

ПЦР РНК гепатита С вместе с генотипированием — очень важная составляющая анализа, т.к. позволяет врачу определить резистентность (устойчивость) вируса, подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения.

Разные генотипы HCV по-разному поддаются противовирусной терапии.

Например, 1 генотип требует до 48 недель лечения, а его эффективность в среднем составляет 60%, тогда как 2 и 3 генотипы лечатся в два раза быстрее с эффективностью до 85%.

Генотипирование также позволяет и косвенно определить состояние печени. Например, 3 генотип HCV нередко сопровождается стеатозом, при котором в клетках органа накапливается жир.

Анализ крови на ПЦР при гепатите С должен выдать цифру, определяющую генотип.

В лабораторных ответах может быть написано «не типируется» — и это значит, что в крови человека находится вирус, не определяемый тестовой системой.

Это может говорить о том, что генотип нехарактерен для данной географической зоны. В этом случае следует повторно сдать анализ с более высокой чувствительностью системы диагностирования.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Тест на гепатит С ПЦР количественный расшифровать можно на основе приведенных выше данных. При получении результатов лабораторных анализов обычно пишутся следующие данные:

  • «найдено»/ «не найдено» (ПЦР качественный на гепатит С);
  • количество РНК-содержащих фракций, например 831.680 ME/мл (анализ на ПЦР количественный);
  • цифра, определяющая генотип HCV, например — 1, 2, 3, 4;
  • название теста — чаще всего Real-time.

Наиболее важным при расшифровке анализа ПЦР на гепатит С считается второй пункт, который показывает вирусную нагрузку, определяющую прогноз, способ и длительность лечения.

Важно: в результате теста рядом с цифрой, показывающей генотип, может стоять латинская буква, например, 1а, что обозначает субтип вируса. Для врача он не имеет значения: для выбора метода лечения берется только генотип.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для расшифровки лабораторных анализов важно обратиться к гепатологу или инфекционисту, который разъяснит полученную информацию в соответствии с видом диагностической системы и порогом ее чувствительности. В медицинской практике существует множество данных анализов крови, которые могут ввести человека без медицинского образования в заблуждение.

Например, если тест на гепатит С ПЦР отрицательный, а ИФА положительный, то может обозначать, что в данный момент в крови пациента нет HCV, но ранее он перенес острую форму гепатита С.

 Принято считать, что позитивный иммуноферментный анализ (ИФА) показывает, что в крови есть антитела, выработанные после вторжения вируса в прошлом.

Но в современной медицинской практике ИФА анализ считается недостаточно надежным и нередко дает нетипичные результаты, поэтому врачи используют его в качестве первичного скрининга. При диагностике заболевания специалисты ориентируются именно на ПЦР тесты.

В следующем видео очень подробно и интересно рассказывается, в чем суть метода ПЦР, как проводится анализ:

Заключение

Для анализа на ПЦР гепатита С обычно берется венозная кровь. Чаще всего происходит двойной забор биологического материала — для ИФА, и непосредственно для ПЦР теста. Для корректных результатов тестов требуется соблюдение основных правил лабораторного забора биологического материала:

  • кровь на анализ сдается в первой половине дня натощак;
  • между приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8 часов;
  • перед сдачей анализа нужно также исключить алкоголь и жареную пищу;
  • в течение суток перед сдачей крови необходимо избегать высоких физических нагрузок.

Результаты тестирования крови обычно готовы на следующий день.

Источник: https://pechenka.online/gepatit/c/analiz-pcr.html

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.